五氟苯酚生物素酯(PFP-Biotin)是一种重要的生物化学试剂,在生物标记和蛋白质研究领域具有广泛应用。本文将全面介绍该化合物的基本性质、主要应用、操作注意事项及常见问题解答。
五氟苯酚生物素酯是由生物素分子与五氟苯酚基团通过酯键连接形成的活性酯化合物。其分子结构中的五氟苯酚基团是良好的离去基团,使该化合物能够与伯氨基(-NH2)发生特异反应,形成稳定的酰胺键。
该试剂通常为白色至类白色固体,需在低温(-20°C)、干燥条件下储存,以避免水解失效。它在有机溶剂(如DMSO、DMF)中具有良好的溶解性,但在水溶液中不稳定,会逐渐水解。
生物素标记:五氟苯酚生物素酯是高效的生物素化试剂,特别适用于:
亲和纯化:标记后的生物分子可通过链霉亲和素/亲和素柱进行高效纯化,广泛应用于:
检测与成像:结合荧光标记的亲和素或酶标亲和素,可用于:
Q:如何确定生物素标记是否成功?
A:可通过以下方法验证:
Q:标记效率低可能的原因?
A:常见原因包括:
Q:是否有替代试剂?
A:是的,其他生物素化试剂包括:
购买五氟苯酚生物素酯时应考虑: