在蛋白质组学与化学生物学的研究中，如何特异性地捕获并研究翻译后修饰（PTM）是一项核心挑战。其中，蛋白质酰化修饰（如琥珀酰化、巴豆酰化等）因其重要的生物学功能而备受关注。当您搜索“酰基生物素置换”这一关键词时，您很可能正致力于解决与此相关的实验难题。本文将全面解析这一技术，解答您可能存在的所有疑问。
酰基生物素置换（Acyl-Biotin Exchange，ABE）是一种高度特异性的化学蛋白质组学技术，专门用于全蛋白质组水平上富集、鉴定和定量检测蛋白质上的酰化修饰位点，尤其是S-酰化修饰（如棕榈酰化）。
它的核心思想可以概括为“置换”二字，即用生物素（Biotin）分子去置换掉原本连接在蛋白质半胱氨酸（Cysteine）残基上的酰基（如棕榈酰基），从而实现对修饰蛋白的高效富集和检测。
其基本实验流程分为三步：
您搜索这一技术，很可能是因为遇到了以下研究痛点，而ABE正是为解决它们而生：
解决低丰度难题：蛋白质酰化修饰（如棕榈酰化）在细胞内是动态且瞬时的，丰度很低。ABE通过生物素-链霉亲和素系统（自然界最强非共价相互作用之一）进行高效富集，能将低丰度的修饰蛋白“浓缩”出来，极大提高检测灵敏度。
实现高度特异性：细胞内有大量游离巯基，极易发生非特异性反应。ABE第一步的封闭步骤和羟胺的特异性切割，确保了只有真正发生酰化修饰的位点才会被最终标记和富集，背景信号极低。
提供全谱分析能力：与抗体依赖的方法（如免疫沉淀）不同，ABE不依赖于特定抗体，因此能够无偏地发现和鉴定整个蛋白质组中所有潜在的酰化修饰蛋白和位点，非常适合进行探索性研究。
兼容多种下游分析：富集后的样品既可以通过Western Blot验证特定目标蛋白的酰化水平，也可以通过液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）进行规模化鉴定和定量，获得修饰位点信息。
了解原理后，您可能更关心它能用来做什么：
如果您正准备开展实验，以下几点至关重要：
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