生物素标记（Biotin Labeling）是一种将生物素分子共价连接到特定目标分子（如蛋白质、核酸等）上的技术。生物素，也称为维生素B7或维生素H，是一种水溶性小分子维生素，其与亲和素（Avidin）或链霉亲和素（Streptavidin）之间具有极高的亲和力（Kd ≈ 10^−15 M），这种结合作用是目前已知最强的非共价相互作用之一。
生物素标记技术主要基于以下原理：
生物素-亲和素系统的高亲和力：生物素与亲和素/链霉亲和素之间的结合具有特异性强、亲和力极高的特点，一旦结合几乎不可逆
生物素化修饰方法：通过化学方法将生物素分子连接到目标分子上：
检测系统：标记后的生物素分子可与连接有报告分子（如酶、荧光染料、胶体金等）的亲和素/链霉亲和素结合，通过检测报告信号来间接检测目标分子
检测与定量：用于Western blot、ELISA、免疫组化等实验中，检测极低含量的目标分子
分离纯化：利用生物素-亲和素系统进行亲和纯化，如分离特定的蛋白质、核酸或细胞
定位与示踪：在细胞或组织内定位特定分子，追踪其分布和动态变化
诊断应用：作为许多诊断试剂盒的关键组成部分，提高检测灵敏度
药物递送：利用生物素-亲和素系统实现靶向药物输送
分子相互作用研究：研究蛋白质-蛋白质、蛋白质-核酸等相互作用
蛋白质生物素标记：
核酸生物素标记：
细胞表面标记：
Western Blot：使用生物素标记的二抗与链霉亲和素-HRP结合，显著提高检测灵敏度
免疫组织化学：通过生物素-链霉亲和素系统放大信号，提高检测效率
亲和纯化：将生物素标记的诱饵蛋白与链霉亲和素珠结合，用于 pull-down 实验
流式细胞术：使用生物素标记抗体与荧光染料标记的链霉亲和素相结合，进行多色分析
优势：
局限性：
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