标记亲和素生物素原理

作者：小编更新时间：2025-08-30

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标记亲和素生物素系统（LAB/LSAB）原理详解：高灵敏度检测的基石

在免疫组化（IHC）、免疫荧光（IF）、ELISA、Western Blot等众多生物化学检测技术中，我们常常追求一个目标：如何将微弱的生物信号放大，使其能够被清晰、准确地捕获到。这就不得不提一种被誉为“生物放大镜”的强大工具——标记亲和素生物素系统。其中最经典的是LAB法（亲和素-生物素标记法）和 LSAB法（链霉亲和素-生物素标记法）。

本文将为您深入解析这一系统的核心原理、独特优势、应用场景及关键注意事项。

一、核心组件：认识三位“主角”

该系统的工作原理建立在三种关键物质之上，它们的合作堪称分子世界的“完美搭档”。

生物素（Biotin）：
- 本质：一种水溶性维生素，又称维生素H或维生素B7。
- 功能：其分子量小（244 Da），可以像“标签”一样非常容易地共价偶联到抗体（如一抗或二抗）或其他蛋白质（如酶）上，而几乎不影响被标记分子的生物活性。这个过程称为“生物素化”。
亲和素（Avidin）与链霉亲和素（Streptavidin）：
- 亲和素：源自蛋清的一种糖蛋白，由四个相同的亚基组成。
- 链霉亲和素：由链霉菌分泌的一种蛋白质，结构类似亲和素，同样具有四个亚基。
- 核心功能：无论是亲和素还是链霉亲和素，每一个分子都拥有四个完全相同的、与生物素结合的位点。它们与生物素的结合具有以下惊人特性：
  - 超高亲和力：结合常数（Kd）高达10^-15 M，是自然界中已知最强、最特异的非共价相互作用之一，结合后几乎不可逆。
  - 极高特异性：结合专一性强，能有效减少实验中的非特异性背景信号。
  - 多价性：一个分子能同时结合最多4个生物素分子。
标记物（Label）：
- 预先与亲和素/链霉亲和素偶联好的报告分子，如：
  - 酶：辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（AP）。它们能催化底物产生颜色沉淀（显色）或发光（化学发光）。
  - 荧光素：FITC、PE、Cy3等，用于荧光检测。
  - 胶体金：用于电镜检测。

标记亲和素生物素原理

标记亲和素生物素系统（LAB/LSAB）原理详解：高灵敏度检测的基石

一、核心组件：认识三位“主角”

二、工作原理：高效的“三级放大”策略

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