在微生物学实验中,MD平板是一种常用的选择性培养基,而生物素作为关键添加剂,其加入量的准确性直接影响实验结果的可靠性。本文将全面解答关于MD平板中生物素加入量的常见问题,帮助您正确配制培养基。
生物素(维生素H)是一种水溶性维生素,在许多微生物的代谢过程中起关键作用。在MD平板中,生物素是某些微生物(如酵母菌)生长所必需的生长因子。缺乏生物素会导致微生物无法正常生长,从而影响筛选或培养效果。
通常情况下,MD平板中生物素的加入量为:20-50 μg/L(微克/升)培养基
具体加入量需根据以下因素调整:
由于生物素的需要量极少,直接称量困难且容易产生误差,建议先配制高浓度储存液:
使用时按照计算好的量加入已灭菌的培养基中即可。
问:生物素加入过多会有什么影响?
答:过量生物素通常不会抑制微生物生长,但会造成浪费,且可能影响某些筛选实验的结果。
问:可以省略生物素吗?
答:对于需要生物素的微生物,省略生物素将导致它们无法生长。请根据您培养的微生物需求决定。
问:如何确定最佳加入量?
答:可通过梯度实验确定,设置不同生物素浓度(如0、10、20、30、40、50μg/L)的平板,观察微生物生长情况。
问:生物素溶液可以保存多久?
答:-20℃保存可达6个月,但建议配制后3个月内使用,避免反复冻融。