生物素探针是一种基于生物素与亲和素/链霉亲和素之间高亲和力结合特性的分子检测工具。生物素,也称为维生素B7或维生素H,是一种水溶性维生素,其与亲和素/链霉亲和素之间的结合被认为是自然界中最强的非共价相互作用之一。这种独特的结合特性使生物素-亲和素系统成为生物医学研究和临床诊断中广泛应用的强大工具。
生物素探针通常由三部分组成:生物素分子、连接臂和识别元件。识别元件可以是抗体、核酸、多肽或其他特异性结合分子,用于靶向目标分子;连接臂则作为间隔物,减少空间位阻;生物素分子作为报告基团,用于后续检测信号的放大和读取。
酶联免疫吸附测定是最常用的生物素探针检测方法之一。该方法通常采用生物素化的抗体作为检测抗体,然后通过酶标记的链霉亲和素与生物素结合,最后加入底物产生可检测的信号。
操作流程:
优点: 高灵敏度、高通量、操作相对简单、成本较低
缺点: 动态范围有限、可能受到钩状效应影响
在免疫组织化学和免疫细胞化学中,生物素探针用于检测组织切片或细胞样本中的抗原分布和定位。
操作流程:
优点: 保留组织细胞形态、可定位抗原分布、直观可视化
缺点: 半定量、操作复杂、可能受内源性生物素干扰
在蛋白质印迹分析中,生物素探针用于检测特定蛋白质的存在和相对含量。
操作流程: