生物素（biotin）与亲和素（avidin）或链霉亲和素（streptavidin）之间的相互作用是生物技术领域中最为强大的非共价结合对之一。这种系统具有极高的亲和力（KD≈10^-15 M），比大多数抗原-抗体相互作用的强度高出数个数量级。正是这种非凡的结合特性，使得生物素-亲和素系统在多种生物技术应用中变得不可或缺。
生物素洗脱的本质是竞争性解离过程。其基本原理是利用高浓度的游离生物素或类似物，竞争性地置换已与亲和素/链霉亲和素结合的生物素化分子。
竞争性置换机制
条件依赖性洗脱
这是最温和、最常用的生物素洗脱方法。通过向系统中加入高浓度（通常2-10 mM）的游离生物素溶液，利用质量作用定律原理，使溶液中的生物素与结合在亲和素上的生物素化分子竞争结合位点。
优点：条件温和，能保持生物分子的活性
缺点：洗脱速度相对较慢，需要大量游离生物素
使用蛋白质变性剂（如6-8M尿素、4-6M胍盐酸盐）或SDS溶液，破坏亲和素/链霉亲和素的三级结构，从而释放结合的生物素化分子。
优点：洗脱效率高，彻底
缺点：会导致蛋白质变性，失去生物活性
利用极端pH条件（如pH2.0-2.5的甘氨酸-HCl缓冲液或pH11-12的碱性缓冲液）暂时改变亲和素/链霉亲和素的构象，降低其与生物素的结合能力。
优点：洗脱效率较高
缺点：可能影响目标分子的稳定性
使用与生物素结构类似但亲和力较低的物质（如脱硫生物素）进行竞争性洗脱。脱硫生物素与链霉亲和素的亲和力比生物素低约1000倍，便于后续去除。
