生物素酰化（Biotinylation）是一种重要的生物化学标记技术，通过在生物分子上共价连接生物素（维生素B7）分子，实现对目标分子的标记、追踪和分离。生物素是一种小分子水溶性维生素，与亲和素（Avidin）或链霉亲和素（Streptavidin）之间具有极高的亲和力，这种结合是自然界中最强的非共价相互作用之一。
生物素酰化技术的核心在于生物素与亲和素类蛋白的特异性结合。这种相互作用具有以下特点：
生物素酰化反应通常通过化学交联剂实现，这些交联剂一端与生物素连接，另一端与目标分子上的特定官能团（如氨基、巯基等）反应。
生物素-亲和素系统广泛应用于亲和纯化，通过将生物素酰化的靶蛋白与固定有亲和素的基质结合，实现高效特异性纯化。
在ELISA、Western blot等免疫分析中，生物素标记的二抗与酶标记的亲和素/链霉亲和素结合，可大幅提高检测灵敏度。
利用生物素酰化作为"诱饵"标记一种蛋白质，与潜在的"猎物"蛋白质共同孵育，通过亲和素介质捕获复合物，用于鉴定新的相互作用伙伴。
细胞表面生物素酰化可用于研究膜蛋白的内化、循环和降解动力学，是膜生物学研究的重要工具。
