多肽合成生物素纯化是多肽化学和生物化学研究中的重要技术,广泛应用于蛋白质相互作用研究、药物开发和诊断试剂制备。本文将全面解析多肽合成生物素纯化的原理、步骤、常见问题及解决方案,帮助研究人员高效完成实验。
生物素(biotin)与亲和素(avidin)或链霉亲和素(streptavidin)之间的相互作用是自然界中最强的非共价结合之一,解离常数Kd可达10^-15 M。这种超高亲和力使生物素-亲和素系统成为多肽纯化和检测的理想选择。

系统特点:

在固相多肽合成(SPPS)过程中,生物素标记主要有两种策略:
N端标记:在多肽序列完全合成后,在N端添加生物素化试剂。常用方法:
侧链标记:通过特殊氨基酸残基引入生物素:
合成完成的多肽在溶液中进行生物素化:


亲和介质选择: