生物素修饰引物是现代分子生物学实验中不可或缺的工具,广泛应用于核酸检测、测序、探针制备等多个领域。本文将全面解析生物素修饰引物的设计原则、修饰类型选择、实验方案及常见问题解决方案,为您提供一份实用的技术指南。

生物素,又称维生素H,是一种小分子维生素,与链霉亲和素或亲和素有极高的亲和力。这种特异性结合能力使生物素-亲和素系统成为分子生物学中最为强大的工具之一。
主要应用领域包括:

5’末端修饰:最常见的修饰方式,适用于多数应用场景

3’末端修饰:特殊情况使用
内部修饰:较少使用,适用于特殊实验设计

连接臂是生物素与引物之间的化学桥梁,其长度直接影响生物素与亲和素的结合效率:
即使添加了生物素修饰,传统引物设计原则仍然适用: