生物素标记的多肽在生命科学研究和药物开发中扮演着重要角色,广泛应用于蛋白质检测、相互作用研究和诊断试剂开发。本文将全面解析多肽合成生物素的技术要点,帮助您深入了解这一重要技术。

多肽生物素化是指在多肽合成过程中或合成后,将生物素分子特异性地连接到多肽上的过程。生物素(维生素H)与亲和素/链霉亲和素之间具有极高的亲和力(Kd≈10^-15 M),这种特性使其成为生物分子标记和检测的理想工具。
生物素化的主要优势:
在固相多肽合成过程中,直接将生物素化试剂通过树脂与多肽连接。这是最常用的方法,特别适用于N端或C端标记。
常用生物素化试剂:

在多肽完全合成并从树脂上切割后,在溶液中进行生物素化。这种方法适用于侧链标记或对酸敏感的多肽。

针对含特定氨基酸的多肽,可采用选择性标记方法:
合适的生物素与多肽比例至关重要。比例过低会导致标记效率不足,比例过高可能引起多肽聚集或活性降低。通常推荐使用1.2-2:1的摩尔比。

选择合适的连接臂可以显著改善生物素化效果: