叠氮化生物素反应是现代生物化学和分子生物学研究中一项重要的标记技术，它结合了生物素-亲和素系统的高亲和力与点击化学的高选择性，为生物分子标记和检测提供了强大工具。
这一技术的核心是将生物素分子通过叠氮基团（-N₃）进行功能化修饰，使其能够与含有炔基的分子发生高效的[3+2]环加成反应，即经典的点击化学反应。这种反应特异性强、效率高，且在水相和生理条件下都能顺利进行，使其特别适合用于生物体系的研究。
叠氮化生物素反应建立在点击化学原理之上，具体属于铜催化的叠氮-炔环加成反应（CuAAC）。该反应需要：
在铜催化剂存在下，叠氮基团与炔基发生环加成反应，形成稳定的1,2,3-三唑环。这一反应具有：
短链叠氮化生物素：如Azide-PEG₄-Biotin
长链叠氮化生物素：如Azide-PEG₁₂-Biotin
