叠氮反应生物素探针是一类将生物素标记与点击化学相结合的重要生物化学工具。其核心原理是利用叠氮基团（-N₃）与炔基基团之间的高效特异性反应——即铜催化的叠氮-炔环加成反应（CuAAC），实现对生物分子的生物素标记。
这类探针通常由三部分组成：
叠氮-生物素探针的工作机制基于点击化学的高选择性反应：
生物素化过程：探针上的叠氮基团与目标分子上预先引入的炔基基团，在铜催化剂存在下发生环加成反应，形成稳定的1,4-二取代三唑连接
检测与捕获：生物素部分可与链霉亲和素偶联的酶、荧光团或固相载体结合，实现目标分子的检测、成像或纯化
互补策略：也可使用炔基修饰的生物素探针与叠氮标记的生物分子反应，两种策略可根据实验需求灵活选择
目标分子修饰：在目标生物分子（蛋白质、核酸等）上引入炔基或叠氮基团
