抗生物素(Avidin)是一种存在于蛋清中的四聚体糖蛋白,分子量约为68kDa。它具有极强的结合能力,能够与生物素(维生素B7)形成几乎不可逆的结合,其解离常数高达10^-15M。这种独特的性质使得抗生物素在生物技术领域有着广泛应用,但同时也会对人体营养吸收和实验系统造成干扰。
除了蛋清中的抗生物素,还有一种类似蛋白——链霉抗生物素(Streptavidin),来源于链霉菌,具有更优越的特性,如中性等电点和较低的非特异性结合。
在实验室环境中,蛋白样品中的抗生物素会严重干扰基于生物素-抗生物素系统的检测方法,如:
这些干扰会导致假阳性或假阴性结果,影响实验的准确性和可重复性。
当含有抗生物素的蛋白样品(如生蛋清)被摄入后,它会与肠道中的生物素结合,阻止生物素的吸收,长期可能导致生物素缺乏症,表现为:
加热是灭活抗生物素最有效的方法之一:
使用蛋白变性剂可以破坏抗生物素的结构:
对于需要保留其他蛋白活性的情况,可以使用生物素亲和层析特异性去除抗生物素:
使用特定的蛋白酶(如胰蛋白酶)消化抗生物素,但需注意这可能同时降解其他目标蛋白。
在实验中设置适当的对照:
尽管蛋白样品中的抗生物素可能带来问题,但它在生物技术和医学中也有重要应用:
蛋白中的抗生物素是一把双刃剑。在实验研究中,它可能成为干扰因素,影响结果的准确性;而在生物技术应用中,它又是强大的工具。关键在于根据具体需求采取适当的处理策略: