蛋白质生物素化是生物化学和分子生物学研究中一项重要的实验技术,通过在蛋白质分子上特异性地标记生物素,为后续的检测、纯化或定位研究奠定基础。本文将全面介绍蛋白质生物素化的正确使用方法,帮助您掌握这一关键技术。

蛋白质生物素化是指将生物素分子共价连接至蛋白质的过程。生物素,也称为维生素B7或维生素H,是一种小分子水溶性维生素,与亲和素或链霉亲和素具有极高的亲和力(Kd≈10^-15 M),是自然界中最强的非共价相互作用之一。
生物素化技术主要利用以下特性:

化学生物素化是通过生物素化试剂与蛋白质表面的特定氨基酸残基发生化学反应实现的。
常用试剂:
操作步骤:

酶促生物素化利用生物素连接酶(如BirA)在特定序列上标记生物素,具有位点特异性强的优点。
常用系统:

操作步骤: