生物素，又称维生素B7或维生素H，是一种水溶性维生素，在生物体内作为羧化酶、脱羧酶和脱氢酶的辅酶参与多种代谢过程。在实验研究中，生物素与蛋白质（特别是链霉亲和素和亲和素）之间的高亲和力相互作用（Kd=10^-15M）被广泛应用于多种生物技术中，如免疫检测、蛋白纯化和细胞标记等。
然而，在某些实验条件下，研究人员需要将生物素从蛋白上移除，这过程称为"蛋白除生物素"。这一需求主要出现在以下情况：重复使用昂贵的链霉亲和素树脂、回收珍贵的生物素化样品、或去除非特异性结合等。
对于某些稳定性高的蛋白质，可通过加热方法使蛋白变性，释放结合的生物素。通常将样品在95°C加热10-15分钟，然后快速离心去除沉淀的蛋白。这种方法简单快捷，但只适用于不需要保留蛋白活性的情况。
使用强变性剂如SDS、尿素或盐酸胍可以破坏蛋白质的三维结构，从而释放结合的生物素。常用的是在样品中加入2-5% SDS并煮沸5分钟。此方法效率高，但同样会导致蛋白不可逆变性。
利用极端pH条件可以破坏生物素-亲和素复合物：
处理后需立即中和，以避免对实验系统造成影响。
使用高浓度游离生物素(2-5mM)与结合在蛋白上的生物素竞争，孵育30-60分钟后，通过透析或超滤去除游离生物素。这种方法温和，能保持蛋白完整性，但效率相对较低。
使用生物素类似物如iminobiotin或脱硫生物素，这些类似物与亲和素的结合力较弱，可在特定条件下（如改变pH）被洗脱，从而实现温和去除。
如果需要保持蛋白质的生物活性，推荐使用以下方法：
当蛋白活性不需要保留时，可选择：
解决方案：
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