生物素与素孵育的区别

作者：小编更新时间：2025-11-18

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生物素

当您在实验协议中看到“加入生物素”和“进行生物素-亲和素孵育”时，可能会产生疑惑：它们是不是一回事？答案是否定的。这两者描述的是完全不同层次和目的的实验步骤。理解它们的区别是掌握许多现代生物技术的关键。

生物素

简单来说，生物素是一个单独的“标签”或“工具”，而生物素-亲和素孵育是一个强大的“信号放大系统”。

下面我们进行详细解析。

生物素

1. 生物素：万能的小分子“标签”

是什么？生物素，又称维生素H或维生素B7，是一种水溶性小分子维生素。它在生物体内是多种羧化酶的辅酶，参与糖、脂肪和蛋白质的代谢。
在实验中的应用：利用生物素分子量小、对蛋白质等生物大分子干扰极小且易于修饰的特性，我们可以将其化学连接到目标分子（如抗体、核酸、凝集素等）上。这个过程称为生物素化。被标记的分子就带上了生物素这个“标签”。
主要目的：标记和固定。标记上生物素后，这个分子就可以被亲和素或其衍生物所识别和捕获。

2. 生物素-亲和素孵育：强大的“信号放大与检测系统”

是什么？这是一个基于生物素与亲和素（或链霉亲和素）之间超高亲和力（Kd ≈ 10^-15 M）的非共价结合系统。这个系统通常包含多个步骤，形成一个完整的检测链条。
系统核心组件：
- 生物素化的分子：如上所述，这是系统的“前端”或“抓手”。
- 亲和素/链霉亲和素：一个四聚体蛋白，有四个完全相同的结合位点，能同时结合四个生物素分子。它是系统的“桥梁”。
- 标记物：连接在亲和素/链霉亲和素上的检测分子，如酶（HRP, AP）、荧光素（FITC, PE）、胶体金等。这是产生可检测信号的“终端”。
主要目的：信号放大和高灵敏度检测。由于一个亲和素能结合多个生物素化分子，同时又能携带多个酶或荧光分子，这一系统能将微弱的生物学信号极大地放大，从而实现超高灵敏度的检测。

生物素

为了更清晰地展示，我们用一个表格来总结：

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